Toxicity and larvicidal activity on Aedes aegypti of citronella essential oil submitted to enzymatic esterification / Toxicidade e atividade larvicida sobre Aedes aegypti de óleo essencial de citronella submetido à esterificação enzimática

Abstract The essential oil of citronella (Cymbopogon winterianus) has several biological activities, among them the insect repellent action. Some studies showed that cinnamic acid esters can be applied as natural pesticides, insecticides and fungicides. In this context, the objective of the present work was to evaluate the production of esters from citronella essential oil with cinnamic acid via enzymatic esterification. Besides, the essential oil toxicity before and after esterification against Artemia salina and larvicidal action on Aedes aegypti was investigated. Esters were produced using cinnamic acid as the acylating agent and citronella essential oil (3:1) in heptane and 15 wt% NS 88011 enzyme as biocatalysts, at 70 °C and 150 rpm. Conversion rates of citronellyl and geranyl cinnamates were 58.7 and 69.0% for NS 88011, respectively. For the toxicity to Artemia salina LC50 results of 5.29 μg mL-1 were obtained for the essential oil and 4.36 μg mL-1 for the esterified oils obtained with NS 88011. In the insecticidal activity against Aedes aegypti larvae, was obtained LC50 of 111.84 μg mL-1 for the essential oil of citronella and 86.30 μg mL-1 for the esterified oils obtained with the enzyme NS 88011, indicating high toxicity of the esters. The results demonstrated that the evaluated samples present potential of application as bioinsecticide.

Resumo O óleo essencial de citronela (Cymbopogon winterianus) possui diversas atividades biológicas, entre elas a ação repelente a insetos. Alguns estudos mostraram que os ésteres do ácido cinâmico podem ser aplicados como pesticidas naturais, inseticidas e fungicidas. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a produção de ésteres a partir do óleo essencial de citronela com ácido cinâmico via esterificação enzimática. Além disso, foi investigada a toxicidade do óleo essencial antes e após a esterificação contra Artemia salina e a ação larvicida sobre Aedes aegypti. Os ésteres foram produzidos utilizando ácido cinâmico como agente acilante e óleo essencial de citronela (3: 1) em heptano e 15% em peso da enzima NS 88011 como biocatalisadores, a 70 ° C e 150 rpm. As taxas de conversão de cinamatos de citronelil e geranil foram 58,7 e 69,0% para NS 88011, respectivamente. Para a toxicidade sobre Artemia salina foram obtidos CL50 de 5,29 μg mL-1 para o óleo essencial e 4,36 μg mL-1 para os óleos esterificados com NS 88011. Na atividade inseticida contra larvas de Aedes aegypti, obteve-se CL50 de 111,84 μg mL-1 para o óleo essencial de citronela e 86,30 μg mL-1 para os óleos esterificados com a enzima NS 88011, indicando alta toxicidade dos ésteres. Os resultados demonstraram que as amostras avaliadas apresentam potencial de aplicação como bioinseticida.

Toxicity and larvicidal activity on Aedes aegypti of citronella essential oil submitted to enzymatic esterification / Toxicidade e atividade larvicida sobre Aedes aegypti de óleo essencial de citronella submetido à esterificação enzimática

The essential oil of citronella (Cymbopogon winterianus) has several biological activities, among them the insect repellent action. Some studies showed that cinnamic acid esters can be applied as natural pesticides, insecticides and fungicides. In this context, the objective of the present work was to evaluate the production of esters from citronella essential oil with cinnamic acid via enzymatic esterification. Besides, the essential oil toxicity before and after esterification against Artemia salina and larvicidal action on Aedes aegypti was investigated. Esters were produced using cinnamic acid as the acylating agent and citronella essential oil (3:1) in heptane and 15 wt% NS 88011 enzyme as biocatalysts, at 70 °C and 150 rpm. Conversion rates of citronellyl and geranyl cinnamates were 58.7 and 69.0% for NS 88011, respectively. For the toxicity to Artemia salina LC50 results of 5.29 μg mL-¹ were obtained for the essential oil and 4.36 μg mL-¹ for the esterified oils obtained with NS 88011. In the insecticidal activity against Aedes aegypti larvae, was obtained LC50 of 111.84 μg mL-¹ for the essential oil of citronella and 86.30 μg mL-¹ for the esterified oils obtained with the enzyme NS 88011, indicating high toxicity of the esters. The results demonstrated that the evaluated samples present potential of application as bioinsecticide.

O óleo essencial de citronela (Cymbopogon winterianus) possui diversas atividades biológicas, entre elas a ação repelente a insetos. Alguns estudos mostraram que os ésteres do ácido cinâmico podem ser aplicados como pesticidas naturais, inseticidas e fungicidas. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a produção de ésteres a partir do óleo essencial de citronela com ácido cinâmico via esterificação enzimática. Além disso, foi investigada a toxicidade do óleo essencial antes e após a esterificação contra Artemia salina e a ação larvicida sobre Aedes aegypti. Os ésteres foram produzidos utilizando ácido cinâmico como agente acilante e óleo essencial de citronela (3: 1) em heptano e 15% em peso da enzima NS 88011 como biocatalisadores, a 70 ° C e 150 rpm. As taxas de conversão de cinamatos de citronelil e geranil foram 58,7 e 69,0% para NS 88011, respectivamente. Para a toxicidade sobre Artemia salina foram obtidos CL50 de 5,29 μg mL-¹ para o óleo essencial e 4,36 μg mL-¹ para os óleos esterificados com NS 88011. Na atividade inseticida contra larvas de Aedes aegypti, obteve-se CL50 de 111,84 μg mL-¹ para o óleo essencial de citronela e 86,30 μg mL-¹ para os óleos esterificados com a enzima NS 88011, indicando alta toxicidade dos ésteres. Os resultados demonstraram que as amostras avaliadas apresentam potencial de aplicação como bioinseticida.

Toxicity and larvicidal activity on Aedes aegypti of citronella essential oil submitted to enzymatic esterification

Abstract The essential oil of citronella (Cymbopogon winterianus) has several biological activities, among them the insect repellent action. Some studies showed that cinnamic acid esters can be applied as natural pesticides, insecticides and fungicides. In this context, the objective of the present work was to evaluate the production of esters from citronella essential oil with cinnamic acid via enzymatic esterification. Besides, the essential oil toxicity before and after esterification against Artemia salina and larvicidal action on Aedes aegypti was investigated. Esters were produced using cinnamic acid as the acylating agent and citronella essential oil (3:1) in heptane and 15 wt% NS 88011 enzyme as biocatalysts, at 70 °C and 150 rpm. Conversion rates of citronellyl and geranyl cinnamates were 58.7 and 69.0% for NS 88011, respectively. For the toxicity to Artemia salina LC50 results of 5.29 g mL-1 were obtained for the essential oil and 4.36 g mL-1 for the esterified oils obtained with NS 88011. In the insecticidal activity against Aedes aegypti larvae, was obtained LC50 of 111.84 g mL-1 for the essential oil of citronella and 86.30 g mL-1 for the esterified oils obtained with the enzyme NS 88011, indicating high toxicity of the esters. The results demonstrated that the evaluated samples present potential of application as bioinsecticide.

Resumo O óleo essencial de citronela (Cymbopogon winterianus) possui diversas atividades biológicas, entre elas a ação repelente a insetos. Alguns estudos mostraram que os ésteres do ácido cinâmico podem ser aplicados como pesticidas naturais, inseticidas e fungicidas. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a produção de ésteres a partir do óleo essencial de citronela com ácido cinâmico via esterificação enzimática. Além disso, foi investigada a toxicidade do óleo essencial antes e após a esterificação contra Artemia salina e a ação larvicida sobre Aedes aegypti. Os ésteres foram produzidos utilizando ácido cinâmico como agente acilante e óleo essencial de citronela (3: 1) em heptano e 15% em peso da enzima NS 88011 como biocatalisadores, a 70 ° C e 150 rpm. As taxas de conversão de cinamatos de citronelil e geranil foram 58,7 e 69,0% para NS 88011, respectivamente. Para a toxicidade sobre Artemia salina foram obtidos CL50 de 5,29 g mL-1 para o óleo essencial e 4,36 g mL-1 para os óleos esterificados com NS 88011. Na atividade inseticida contra larvas de Aedes aegypti, obteve-se CL50 de 111,84 g mL-1 para o óleo essencial de citronela e 86,30 g mL-1 para os óleos esterificados com a enzima NS 88011, indicando alta toxicidade dos ésteres. Os resultados demonstraram que as amostras avaliadas apresentam potencial de aplicação como bioinseticida.

Morphogenesis of stockpiled Marandu, Piatã, Xaraés and Paiaguás brachiaria grass cultivars / [Morfogênese de cultivares de capins marandu piatã, xaraés e paiaguás diferidos]

The objective this study was to identify differences in the morphogenic patterns of four Urochloa brizantha cultivars (marandu, piatã, xaraés and paiaguás grasses) during the stockpiling period. A completely randomized design was used, with three replications, in experimental plots of 9m². The evaluations took place over 2 years. The grasses were stockpiled for 92 (Year 1) and 95 (Year 2) days. The leaf appearance rate of paiaguás grass was higher, compared to other grasses. In Year 1, the stem elongation rate of xaraés grass was higher than other grasses. At the end of stockpiling period of Year 1, the tiller population density (TPD) was higher in the paiaguás grass, intermediate in the xaraés and marandu grasses and lower in the piatã grass. At the end of the stockpiling period in Year 2, TPD was higher in the paiaguás grass canopy, intermediate in the marandu and piatã grasses canopies, and lower in the xaraés grass canopy. Paiaguás grass has greater leaf growth during the stockpiling period and is therefore suitable for use under stockpiled grazing. Xaraés grass has high stem elongation during the stockpiling period, which is why its use under stockpiled grazing must be accompanied by adjustments in pasture management.(AU)

O objetivo deste estudo foi identificar diferenças nos padrões morfogênicos de quatro cultivares de Urochloa brizantha (marandu, piatã, xaraés e paiaguás) durante o período de diferimento. Foi utilizado o delineamento inteiramente ao acaso, com três repetições, em parcelas experimentais de 9m². As avaliações ocorreram por dois anos. Os capins foram diferidos por 92 (Ano 1) e 95 (Ano 2) dias. A taxa de aparecimento foliar do capim-paiaguás foi maior, em comparação aos demais capins. No Ano 1, a taxa de alongamento do colmo do capim-xaraés foi superior aos demais capins. No final do diferimento do Ano 1, a densidade populacional de perfilho (DPP) foi maior no capim-paiaguás, intermediária nos capins xaraés e marandu e inferior no capim-piatã. No fim do período de diferimento do Ano 2, a DPP foi superior no dossel de capim-paiaguás, intermediária nos dosséis dos capins marandu e piatã, e menor no dossel de capim-xaraés. O capim-paiaguás tem maior crescimento foliar durante o período de diferimento, sendo, portanto, apropriado para uso sob pastejo diferido. O capim-xaraés apresenta elevado alongamento de colmo durante o período de diferimento, razão pela qual seu uso sob pastejo diferido deve vir acompanhado de ajustes no manejo da pastagem.(AU)

Does the lowering strategy before the stockpiling period modify the marandu palisade grass production and structure? / [A estratégia de desfolhação prévia ao período de diferimento modifica a produção e a estrutura do capim-marandu?]

The objective was to identify lowering strategies for Urochloa brizantha cv. Marandu in the beginning of the stockpiling period that increase forage production and improve the structure of stockpiled canopies. Three lowering strategies were evaluated: maintenance of marandu palisade grass with 15cm four months before the stockpiling period; maintenance of palisade grass with 30cm for four months, and lowering to 15cm before the stockpiling period; and maintaining of palisade grass at 45cm for four months, and lowering to 15cm before the stockpiling period. The experimental design was completely randomized, with four replications. At the end of stockpiling, the number of reproductive tillers and forage mass were higher in the canopy under 15/15cm than in the others; the percentage of live leaf was higher in the canopy under 45/15cm than under 15/15cm. Forage production during the stockpiling period was higher in the canopy under 15/15cm and lower in the under 45/15cm. Maintaining 15cm marandu palisadegrass for four months before the stockpiling period increases forage production during this period. The lowering of the marandu palisadegrass from 45 to 15cm at the beginning of the stockpiling period improves the structure of the stockpiled canopy.(AU)

Objetivou-se identificar estratégias de rebaixamento da Urochloa brizantha cv. Marandu no início do diferimento, as quais resultem em aumento da produção e em melhoria da estrutura do dossel diferido. Foram avaliadas três estratégias de rebaixamento no início do diferimento: manutenção do capim-marandu com 15cm por quatro meses antes do início do diferimento; manutenção do capim-marandu com 30cm por quatro mese, e rebaixamento para 15cm no início do diferimento; e manutenção do capim com 45cm por quatro meses e rebaixamento para 15cm no início do diferimento. O delineamento foi inteiramente ao acaso, com quatro repetições. No fim do diferimento, o número de perfilho reprodutivo e a massa de forragem foram superiores no dossel sob 15/15cm do que nos demais; a percentagem de folha viva foi maior no dossel sob 45/15cm do que sob 15/15cm. A produção de forragem durante o diferimento foi superior no dossel sob 15/15cm e inferior no sob 45/15cm. A manutenção do capim-marandu com 15cm por quatro meses antes do período de diferimento aumenta a produção de forragem neste período. O rebaixamento do capim-marandu de 45 para 15cm no início do diferimento melhora a estrutura do dossel diferido.(AU)

Riscos da suplementação com doses excessivas de vitamina D / Risks of Supplementation with Excessive Doses of Vitamin D

A intoxicação por vitamina D era pouco frequente no Brasil até seu crescente uso na última década. Neste artigo relatamos um caso de intoxicação por vitamina D em que houve a prescrição intencional de dose muito superior ao recomendado pela literatura, com a finalidade de prevenir doenças via "modulação hormonal". A paciente em questão, idosa, previamente hígida, foi submetida a um tratamento não regulamentado e sem respaldo científico, que culminou em sintomas como náuseas e vômitos, além de perda de peso, inapetência, poliúria e astenia ao longo dos meses. Através da história e exames laboratoriais foi diagnosticada intoxicação por vitamina D e lesão renal aguda. Após o tratamento houve remissão completa dos sintomas. A "modulação hormonal" é uma prática condenada pelos Conselhos Federais de Medicina e Odontologia e pela Sociedade Brasileira de Endocrinologia e Metabologia. O ato de prescrever é de grande responsabilidade ética e técnica e deve ser embasado em evidências científicas, oferecendo o melhor tratamento possível aos pacientes, seja ele preventivo ou curativo, minimizando riscos e danos, respeitando as recomendações das autoridades competentes. (AU)

Vitamin D poisoning was not frequent in Brazil until its increasing use in the last decade. In this article, we report a case of intoxication by intentional prescription of vitamin D in a much higher dose than the literature recommends, in order to prevent diseases via "hormonal modulation". The case described in this report was an elderly woman, previously healthy patient that was submitted to an unregulated treatment without scientific support, leading to symptoms such as nausea and vomiting, in addition to weight loss, lack of appetite, polyuria and asthenia over the months. Through the history and laboratory testing, vitamin D intoxication and acute kidney injury were diagnosed. After treatment, there was a complete remission of the symptoms. "Hormonal modulation" is a practice condemned by the Federal Councils of Medicine and Dentistry and by the Brazilian Society of Endocrinology and Metabology. The act of prescribing is of great ethical and technical responsibility and it must be based on scientific evidence. Thus, the patient can receive the best possible treatment, for either preventive or curative nature, by respecting the recommendations of the competent authorities and, therefore, minimizing risks and damages to patients. (AU)

Artrogripose Múltipla Congênita: Relato de dois casos / Arthrogryposis Multiplex Congenita: Report of two cases

RESUMO: A Artrogripose Múltipla Congênita (AMC) é uma síndrome rara, que representa um grupo de condições congênitas caracterizado por contraturas articulares em duas ou mais articulações, não progressivas, geralmente simétricas, de etiologia desconhecida e que pode estar associada a outras malformações, como viscerais e neurológicas. Apresenta-mos dois casos isolados com achados característicos de AMC, atendidos em ambulatório de pediatria de alto risco de uma cidade do Oeste do Paraná. Caso 1: lactente, sexo feminino, 14 dias de vida, com redução dos movimentos fetais referidos pela mãe, apresentando malformações envolvendo somente os membros, visualizadas logo após o nasci-mento. Caso 2: lactente, sexo masculino, quatro meses de vida, com diagnóstico de hipocinesia fetal ao ultrassom obstétrico de 23 semanas, ao nascimento apresenta contraturas dos membros e disfunção do sistema nervoso cen-tral. O diagnóstico da artrogripose é complexo e essencialmente clínico, sendo necessária uma anamnese meticulosa, contemplando uma avaliação da gestação, via de parto, história familiar e um exame físico minucioso, classificando quais os tipos de contraturas, membros envolvidos, presença de musculatura alterada e de alterações neurológicas, a fim de diferenciar a AMC das outras síndromes que também cursam com contraturas articulares. O seguimento e tratamento dos lactentes com artrogripose devem ocorrer em acompanhamento multidisciplinar devido às variadas manifestações que a doença pode apresentar e à característica de recidiva ao longo dos anos. (AU)

ABSTRACTArthrogryposis Multiple Congenita (AMC) is a rare syndrome that represents a group of congenital conditions character-ized by joint contractures in two or more joints, non-progressive, usually symmetrical, of unknown etiology and which may be associated with other malformations, such as visceral and neurological. We present two isolated cases with characteristic features of AMC, seen in a high-risk pediatrics outpatient clinic in a city in western Paraná. Case 1: infant, female, 14 days old, with reduced fetal movements reported by the mother, presenting malformations involving only the limbs, seen immediately after birth. Case 2: infant, male, four months old, diagnosed with fetal hypokinesia on 23-week obstetric ultrasound, at birth, presents limb contractures and central nervous system dysfunction. The diagnosis of ar-throgryposis is complex and essentially clinical, requiring a meticulous anamnesis, including an assessment of pregnan-cy, delivery, family history and a thorough physical examination, classifying what types of contractures, involved limbs, presence of altered musculature and neurological changes to differentiate AMC from other syndromes that also have joint contractures. The aftercare and treatment of infants with arthrogryposis must occur in multidisciplinary follow-up due to the varied manifestations that the disease may present and the characteristic of recurrence over the years. (AU)

Gall traits and galling insect survival in a multi-enemy context / Características de las agallas, y supervivencia de insectos que producen agallas, en el contexto de enemigos múltiples

Introduction: The enemy hypothesis postulates that gall traits protect galling insects against natural enemies. Galls show a huge range of sizes, colors and ornaments, which vary even intraspecifically. However, galling insects are targets of various organisms that attack them directly or indirectly. In this context, to consider only one gall trait to investigate gall structure acting against only one guild of enemies can conceal an understanding of the community-level interactions. Objective: Herein, we take these ideas into consideration to investigate the conspicuous galls induced by Palaeomystella oligophaga Becker and Adamski 2008 (Lepidoptera) on Macairea radula (Bonpl.) (Melastomataceae) as a model system. We characterize this system through categorization of the different enemy guilds present in the community. We identified them to the lowest taxonomic level possible and determined the kind of interaction responsible for galling insects' deaths. Considering the enemy hypothesis and the selection of secondary characteristics, we also aimed to determine which of the multiple gall traits influence the survival success of galling insects in a multi-enemy context. Methods: We inspected galls and characterized the enemy guilds affecting the galling insect and the mortality rates produced by each one of them. Next, we tested whether the distinct gall traits measured (parenchyma thickness, color, projections) promote galling insect survival with respect to each enemy. Results: The mortality induced by indirect enemies (organisms that interact with gall tissues and can interact secondarily with galling insect) was 47.3 %, being higher than that caused by parasitoids and predators (31.5 %). Despite the gall's structural complexity, live galling insects showed the smallest occurrence (21.2 %). Parenchyma thickness was negatively related to Calliephialtes parasitoids, Gelechiidae cecidophages and predation signals. Conclusions: We demonstrated that the attacks to gall tissues by the cecidophages represented the highest threat to P. oligophaga survival, being higher than the mortality caused by direct enemies. That is, the gall traits were not as efficient as supposed to protect the galling insect from the attack of natural enemies. Nevertheless, we also demonstrated that parenchyma thickness can be negatively related to some organisms, especially direct enemies. Other traits hypothesized as defensive (e.g. projections, coloration) may simply play no role.

Introducción: La hipótesis del enemigo postula que las características de la agalla protegen al agallero contra los enemigos naturales. Las agallas muestran una gran variedad de tamaños, colores y adornos, que varían incluso de forma intraespecífica. Sin embargo, los agalleros son objetivos de varios organismos que los atacan directa o indirectamente. En este contexto, considerar solo una característica para investigar la estructura de la agalla actúando contra un solo gremio de enemigos puede ocultar una comprensión de las interacciones a nivel comunitario. Objetivos: Para investigar las ideas presentadas usamos las agallas conspicuas inducidas por Palaeomystella oligophaga Becker y Adamski 2008 (Lepidoptera) en Macairea radula (Bonpl.) (Meslastomataceae) como sistema modelo. Describimos este sistema a través de la categorización de los diferentes gremios enemigos presentes en la comunidad. Los identificamos al nivel taxonómico más bajo posible y determinamos el tipo de interacción responsable de la muerte de los agalleros. Teniendo en cuenta la hipótesis del enemigo y la selección de características secundarias, también buscamos determinar cuáles de las múltiples caracteristicas de la agalla influyen en el éxito de supervivencia de los agalleros en un contexto de enemigos múltiples. Métodos: Inspeccionamos las agallas y caracterizamos los gremios enemigos que afectan al agallero y las tasas de mortalidad producidas por cada uno de ellos. Luego, probamos si las distintas caracteristicas de las agallas medidas (grosor del parénquima, color, proyecciones) promueven la supervivencia de los agalleros con respecto a cada enemigo. Resultados: La mortalidad indirecta inducida por los cecidofagos fue del 47.3 %, superior a la causada por los parasitoides y los depredadores (31.5 %). Apesar de la complejidad estructural de la agalla, los agalleros vivos mostraron la menor presencia (21.2 %). El grosor del parénquima se relacionó negativamente con los parasitoides de Calliephialtes, los cecidófagos de Gelechiidae y la depredación. Conclusiones: Demostramos que los ataques a los tejidos biliares por cecidófagos representaron la mayor amenaza para la supervivencia de P. oligophaga. Esto es interesante porque, de acuerdo con la hipótesis del enemigo, la estructura de las agallas debería proporcionar protección para los insectos agalleros en lugar de atraer a los insectos que se alimentan de la agalla misma. Sin embargo, también demostramos que el grosor del parénquima puede estar relacionado negativamente con algunos organismos, especialmente los enemigos directos. Otras caracteristicas hipotéticas como defensivas (por ejemplo, proyecciones, coloración) pueden simplemente no desempeñar ningún papel.

Pneumomediastino, pneumotórax e enfisema subcutâneo em cão com pneumopatia e infecção pelo vírus da cinomose: relato de caso / Pneumomediastinum, pneumothorax and subcutaneous emphysema in a dog with pneumopathy and infection by the canine distemper virus: case report

Relata-se um caso de pneumomediastino, pneumotórax e enfisema subcutâneo em um cão com pneumopatia associada à cinomose. As queixas principais eram tosse, secreção nasal purulenta, apatia e enfisema subcutâneo em face, região cervical e torácica. O exame radiográfico evidenciou pneumomediastino, pneumotórax e broncopneumopatia grave com áreas de consolidação pulmonar. Teste rápido imunocromatográfico para detecção de antígeno da cinomose foi positivo e houve melhora dos sinais respiratórios com antibioticoterapia, porém o quadro evoluiu para alterações neurológicas. De acordo com a revisão de literatura realizada, não há casos semelhantes relatados.(AU)

A case of pneumomediastinum, pneumothorax and subcutaneous emphysema in a dog with pneumopathy associated to distemper is reported. The main complaints were cough, purulent nasal discharge, lethargy and subcutaneous emphysema in the face, neck, and chest area. Radiographic examination showed pneumomediastinum, pneumothorax, and severe bronchopneumopathy with areas of pulmonary consolidation. Rapid test for canine distemper antigen detection was positive. After the antibiotic therapy there was an improvement of respiratory signs; however, the patient developed neurological symptomatology. As far as the author´s knowledge by literature review carried out, there are no similar cases reported.(AU)

Toxicity of clove essential oil and its ester eugenyl acetate against Artemia salina / Toxicidade do óleo essencial de cravo e seu éster acetato de eugenila contra Artemia salina

Abstract The production of compounds via enzymatic esterification has great scientific and technological interest due to the several inconveniences related to acid catalysis, mainly by these systems do not fit to the concept of “green chemistry”. Besides, natural products as clove oil present compounds with excellent biological potential. Bioactives compounds are often toxic at high doses. The evaluation of lethality in a less complex animal organism can be used to a monitoring simple and rapid, helping the identification of compounds with potential insecticide activity against larvae of insect vector of diseases. In this sense, the toxicity against Artemia salina of clove essential oil and its derivative eugenyl acetate obtained by enzymatic esterification using Novozym 435 as biocatalyst was evaluated. The conversion of eugenyl acetate synthesis was 95.6%. The results about the evaluation of toxicity against the microcrustacean Artemia salina demonstrated that both oil (LC50= 0.5993 µg.mL–1) and ester (LC50= 0.1178 µg.mL–1) presented high toxic potential, being the eugenyl acetate almost 5 times more toxic than clove essential oil. The results reported here shows the potential of employing clove oil and eugenyl acetate in insecticide formulations.

Resumo A produção de compostos via esterificação enzimática possui grande interesse científico e tecnológico devido às inúmeras inconveniências relacionadas com a catálise ácida, principalmente por estes sitemas não se adequarem ao atual termo “tecnologias limpas”. Além disso, produtos naturais como o óleo de cravo, apresentam compostos com excelentes potenciais biológicos. Compostos bioativos são quase sempre tóxicos em altas doses. A avaliação da letalidade em um organismo animal menos complexo pode ser usada para um monitoramento simples e rápido, servindo também para a identificação de compostos com potencial atividade inseticida contra larvas de insetos vetores de doenças. Neste sentido, foi determinada a toxicidade frente a Artemia salina do óleo essencial de cravo e do seu derivado acetato de eugenila obtido por esterificação enzimática com lipase Novozym 435. A conversão da reação de síntese de acetato de eugenila foi de 95,6%. Os resultados referentes à avaliação da toxicidade frente ao microcrustáceo Artemia salina demonstraram que tanto o óleo (LC50= 0,5993 µg.mL–1) quanto o éster (LC50= 0,1178 µg.mL–1) apresentam elevado potencial toxicológico, sendo que o éster apresenta aproximadamente 5 vezes mais toxicidade em relação ao óleo. Estes resultados demonstram o potencial emprego do óleo de cravo e de acetato de eugenila em formulações de inseticidas.

Adrenal glands of Spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii, Wagler, 1831): morphological and morphometric aspects / Glândulas adrenais de preás (Galea spixii, Wagler, 1831): aspectos morfológicos e morfométricos

Abstract Considering the physiological importance and need of greater morphophysiological knowledge of adrenal glands, the aims of present study were compare the morphometric data between left and right adrenal of male and female; perform a histological, scanning and transmission electron microscopy study showing tissue constitution of glands; finally, in order to define the presence and correct site of the cytochrome P450c17 expression in adrenal glands, immunohistochemical study of this enzyme was performed in 18 adrenal glands (right n=9 and left n=9) of nine adult Galea spixii (four males and five females). Right adrenal was more cranially positioned than left adrenal; dimensions (weight, length and width) of right adrenal was larger than left adrenal; no differences between male and female body and adrenal measurements were found; the morphology of cells and different amounts of lipid droplets may be related to the different demands of steroid hormones production, related to each zone of the adrenal cortex; and, the cytochrome P450c17 immunolocalization in fasciculate and reticular zone may be related with synthesis of 17-hydroxy-pregnenolone, 17-hydroxy-progesterone, dehydroepiandrosterone or androstenedione.

Resumo Considerando a importância fisiológica e a necessidade de melhor conhecimento morfofisiológico das glândulas adrenais, os objetivos do presente estudo foram comparar dados morfométricos entre adrenais direitas e esquerdas de machos e fêmeas; realizar estudos histológicos e microscopia eletrônica de varredura e transmissão revelando a constituição tecidual das glândulas; finalmente, foi realizado estudo imunohistoquímico com objetivo de definir a presença e correto sítio de expressão da citocromo P450c17 nas glândulas adrenais em 18 glândulas adrenais (direita n=9 e esquerda n=9) de nove Galea spixii adultos (quatro machos e cinco fêmeas). A glândula adrenal direita estava posicionada mais cranialmente que a adrenal esquerda; as dimensões (peso, comprimento e largura) da glândula adrenal direita foram maiores que as da esquerda; não houve diferença entre as medidas corpóreas e das adrenais entre machos e fêmeas; a morfologia das células e diferentes quantidades de gotículas lipídicas podem estar relacionadas a diferentes demandas na produção de hormônios esteroides relacionados a cada zona do córtex adrenal; e, a imunolocalização da citocromo P450 na zona fasciculada e reticular pode estar relacionado com a síntese de 17-hidroxi-pregnenolona, 17-hidroxi-progesterona, dehidroepiandrosterona ou androstenediona.

Avaliação dos perfis minerais séricos, urinários e sedimentares de ovinos recebendo dieta calculogênica / Evaluation of mineral profile in serum, urine and sediment of sheep receiving calculogenic diet

A urolitíase obstrutiva em pequenos ruminantes é uma doença metabólica de etiologia multifatorial com distribuição mundial. A elevação da concentração urinária de solutos, minerais ionizados (cristaloides) que formam cristais insolúveis é citada por alguns autores como o fator mais importante. Assim, o conhecimento do perfil mineral dos animais submetidos a dietas calculogênicas e a composição química dos urólitos tornam-se ferramentas eficazes na prevenção da doença. Neste estudo, foram utilizados 14 ovinos hígidos, machos (não castrados), da raça Santa Inês, com idade aproximada de 90 dias, distribuídos em dois grupos (G1 - sem vitamina C e G2 - com vitamina C) e alimentados com dieta calculogênica. A análise dos perfis minerais, séricos e urinários revelou completo desbalanceamento na relação entre concentrações de cálcio, fósforo e magnésio, havendo elevação expressiva do fósforo e do magnésio e diminuição substancial do cálcio. Com isso, a análise bioquímica dos urólitos demonstrou que o cálcio esteve presente em 50% das amostras analisadas.(AU)

Urolithiasis in small ruminants is a metabolic disease of multifactorial etiology with worldwide distribution. Increased urinary concentration of solutes, ionized minerals (crystalloid) that form insoluble crystals is cited by some authors as the most important factor. Thus, knowledge of mineral profile of the animals fed calculogenic diets and chemical composition of uroliths becomes an effective tool in preventing the disease. In this study, we used 14 healthy, male, non-neutered sheep, of the Santa Ines breed, aged approximately 90 days, divided into two groups (G1-without vitamin C and G2-with vitamin C) fed calculogenic diet. Analysis of mineral profiles in serum and urine revealed complete imbalance in the relationship between concentrations of calcium, phosphorus and magnesium, with significant increase of phosphorus and magnesium and substantial reduction of calcium. Thus, biochemical analysis of uroliths showed that calcium was present in 50% of samples.(AU)

Desempenho, sanidade animal e qualidade de filés de tilápias alimentadas com ração suplementada com biomassa bacteriana / Performance, animal health and fillets quality of tilapia fed diets supplemented with bacterial biomass

A aquicultura moderna é um dos setores de produção de alimentos que mais cresce no mundo. A tilápia, além de possuir grandes vantagens produtivas, origina produtos com grande aceitação pelo mercado. Em sua nutrição, podem ser utilizados aditivos com finalidades zootécnicas, pigmentantes ou antioxidantes. Este estudo objetivou avaliar o efeito da suplementação da dieta de tilápias com biomassa de Rubrivivax gelatinosus sobre o desempenho zootécnico e a saúde dos animais (histologia e hematologia) e sobre as características de qualidade dos filés (pH, composição químico-bromatológica, cor e rancidez). O experimento contou com seis tratamentos, compostos de um grupo controle, sem aditivos, um grupo contendo pigmentante comercial e quatro grupos com a biomassa nas concentrações de 175, 350, 700 e 1400mg/kg. Peixes pesando 21,42±5,65g foram criados por 74 dias em sistema com recirculação de água e, posteriormente, foram abatidos para a realização das análises. Não foram encontradas diferenças para os resultados das análises de desempenho, histológicas e hematológicas. Os filés dos grupos alimentados com os aditivos apresentaram menor umidade que o grupo controle, e os filés dos grupos alimentados com biomassa apresentaram as maiores teores proteicos. Não houve diferenças entre os tratamentos para os valores de pH, lipídeos e cinzas. Quanto à cor dos filés, todos os tratamentos com aditivos aumentaram a intensidade de vermelho. Em todos os tratamentos, a rancidez dos filés foi crescente durante o armazenamento, embora em menores valores nos filés dos grupos tratados com as maiores concentrações de biomassa. A biomassa de R. gelatinosus não promoveu alterações no desempenho nem na saúde animal e mostrou-se capaz de melhorar os aspectos de qualidade e conservação dos filés.

Modern aquaculture is one of the fastest growing food sectors in the world. Beyond having productivity advantages, tilapia fish yields products with great market acceptance. For its nutrition, additives aiming at increasing zootechnical, pigmenting or antioxidant features may be used. This study aimed to evaluate the effect of the supplementation of tilapia diets with Rubrivivax gelatinosus biomass on the performance and the health of animals (histology and hematology), and on the quality of fillets (pH, proximate composition, color and rancidity). The experiment comprised six treatments, made of a control group with no additives, a group containing commercial pigments and four groups with biomass at 175, 350, 700 and 1400 mg/kg. Fish weighing 21.42±5.65g were reared for 74 days in a system with water recirculation and slaughtered for analyzes. No differences were detected for performance, histological and hematological analyzes. Fillets of the groups fed additives had lower moisture content than the control group while the fillets of the groups fed the biomass had the highest protein percentages. No differences were detected among treatments for pH​, lipids and ash values. Regarding to the color of the fillets, all treatments with additives increased redness. For all treatments, rancidity in the fillets increased during storage, although the groups treated with the highest biomass concentrations had the lowest values. R. gelatinosus biomass did not change performance and animal health, and proved to be capable of improving fillets quality features and conservation.

Identificação espécie-específica de carnes e produtos cárneos de origem bubalina e bovina pela técnica de PCR-RFLP / Species-specific identification of red-meat and meat derivative products with the PCR-RFLP technique

Para avaliar a viabilidade da metodologia da Reação em Cadeia da Polimerase associada com o Polimorfismo de Fragmentos de DNA (PCR-RFLP) na identificação de fraude intencional e contaminação acidental em produtos cárneos de origem bubalina, in natura e processados, foram testadas amostras puras e amostras de carnes com misturas controladas, produzidas em laboratório, com adição de 1%, 5%, 10% e 50% de carne bovina em carne de búfalo, homogeneizada crua e em amostras autoclavada. Foram comparados, ainda, diferentes métodos de extração, usando um kit comercial e a técnica clássica, utilizando fenol/clorofórmio. O resultado estatístico foi obtido por tabela de contingência, analisada pelo teste do qui-quadrado (χ2) e do exato de Fisher. A especificidade encontrada foi altamente significativa (P<0,0001). Observou-se também sensibilidade altamente significativa nas diluições a partir de 10% (P<0,0001). A técnica tem alta especificidade e sensibilidade para detectar até mesmo contaminação de 1%, mas a repetibilidade desse resultado impede a aplicação oficial desse método para a inspeção de contaminação acidental, sendo recomendada somente para inspeção de fraude a partir de 10% de substituição. Em carnes autoclavadas, a eficácia do teste é menor. A técnica pode ser empregada para certificação de produto específico (selo de identidade de espécie).

The present study aimed at evaluate the viability of PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism) for identification of fraud and/or accidental contamination in buffalo meat - fresh and processed. Pure, autoclaved and controlled fraud samples, produced in the laboratory with the addition of 1, 5, 10 and 50% of beef in raw homogenized buffalo meat samples, were tested. Furthermore, different extraction methods, using a commercial kit and classical technique using phenol-chloroform, were compared. The statistical result was obtained by contingency table analyzed by chi-square and the Fisher exact test. The specificity was highly significant (p <0.0001), and the sensitivity was highly significant in dilutions from 10% (p <0.0001). Despite its accuracy and precision, capable to detect a contamination level of 1%, PCR-RFLP technique is not recommended for inspection in cases of accidental contamination. This is due to the need of test repetition in levels of contamination lower than 10%. The efficiency of this test is lower to autoclaved meat. The PCR-RFPL technique can be used for certification of food made with specific species (species identification certification stamp).